Совместимость микрокварцевых кювет с лабораторными спектрометрами

Установка кюветы неправильного формата в прецизионный оптический прибор приводит не просто к потере образца, а к молчаливому искажению данных, на восстановление которых могут уйти недели. Каждая платформа прибора накладывает определенный набор физических и оптических условий приемки, и только кюветы, удовлетворяющие всем трем требованиям одновременно, дают надежные результаты.

Микрокварцевые кюветы - это инструмент, который выбирают там, где не хватает объема образца, где концентрация аналитов экстремальна или где прозрачность УФ-излучения ниже 300 нм не является обязательным условием. Однако совместимость никогда не предполагается - она должна быть проверена с учетом высоты луча, геометрии щели и минимального объема заполнения для каждого прибора в отдельности. В последующих разделах эта трехпараметрическая схема последовательно применяется к каждому семейству основных платформ, охватывая спектрофотометры UV-Vis, специализированные флуорометры и платформы, для которых измерение с помощью кювет вообще не применимо.

В этой статье представлены проверенные данные о совместимости приборов Agilent, Shimadzu, PerkinElmer, Thermo Fisher, Horiba, Edinburgh Instruments и Varian Cary Eclipse с указанием габаритных характеристик, ссылок на комплектующие и пороговых значений рабочего объема для каждой модели.

---

Что микро-кварцевые кюветы требуют от любого прибора

Прежде чем использовать данные о совместимости с конкретным брендом, необходимо точно определить три физических параметра, которые определяют, будет ли микро-кварцевая кювета правильно работать в конкретном приборе.

• Высота луча (Z-измерение): Z-измерение кюветы - это перпендикулярное расстояние от ее основания до центра прозрачного измерительного окна. Большинство настольных УФ-Вис спектрофотометров и флуорометров построены на основе высоты луча 8,5 мм. Микро-кварцевая кювета с размером Z, отклоняющимся более чем на 0,5 мм от высоты луча прибора приведет к тому, что луч света будет упираться в верхнюю или нижнюю стенку кюветы, внося артефакты паразитного света и подавляя истинную абсорбцию на 5-30% в зависимости от концентрации и длины пути. Этот единственный параметр является наиболее распространенной причиной несовместимости микро-кювет на всех платформах.

• Геометрия щели (размеры кюветного отсека): Стандартные кюветные отсеки предназначены для 12,5 мм × 12,5 мм внешний размер. Большинство микро-кварцевых кювет, представленных на рынке, сохраняют этот внешний размер, поэтому они могут устанавливаться непосредственно в стандартный держатель без адаптации. Субмикроформаты с уменьшенной площадью основания 8,5 мм × 8,5 мм или меньше требуют использования прецизионного центрирующего адаптера для приведения кюветы в соответствие с лучом. Неправильно подобранный адаптер вносит ошибки бокового смещения, которые функционально неотличимы от смещения в Z-измерении в получаемом спектре.

• Минимальный объем образца по отношению к диаметру пучка: Падающий луч должен полностью проходить через столб жидкости внутри кюветы. Для микрокварцевых кювет с рабочим объемом 10-70 мклдиаметр пучка в плоскости образца варьируется от 2-4 мм в приборах UV-Vis и сужается до 1-2 мм в оптике возбуждения фокусированного флуорометра. Заполнение кюветы ниже центральной линии луча - даже на 1 мм - приводит к артефакту парового пространства, который проявляется в виде воспроизводимого, но физически бессмысленного плеча поглощения, особенно между 200-230 нм.

Взаимодействие между этими тремя ограничениями означает, что совместимость никогда не является вопросом одной переменной. Кювета из микрокварца, удовлетворяющая требованиям к высоте пучка, может не пройти проверку геометрии щели, если используется нестандартный адаптер, а кювета, удовлетворяющая обоим физическим ограничениям, может не справиться с задачей, если не соблюдается минимальный объем заполнения для конкретной выбранной длины пути.

---

Совместимость кварцевых кювет Agilent Micro с кюветами серии Cary

Среди платформ спектрофотометров UV-Vis серия Cary компании Agilent неизменно занимает верхние строчки в обсуждениях совместимости кювет на ResearchGate, r/labrats на Reddit и в результатах опроса People Also Asked в Google. Линейка Cary включает в себя конфигурации от компактной однолучевой Cary 60 до исследовательской Cary 5000, и каждая модель отличается размерами отсеков и экосистемами аксессуаров, которые напрямую влияют на то, какие форматы микрокварцевых кювет можно использовать без оптических компромиссов. Понимание различий между моделями очень важно, поскольку приборы Cary разных уровней часто находятся рядом в одном и том же помещении и не являются оптически взаимозаменяемыми с точки зрения микро-кювет.

Cary 60 - однолучевая геометрия и зазор между пазами микро-кюветы

Cary 60 - самый распространенный однолучевой UV-Vis прибор в обычных аналитических лабораториях, а его фиксированная высота луча 8,5 мм полностью совместим с Z-измерением стандартных микрокварцевых кювет с внешней площадью 12,5 мм × 12,5 мм.

Стандартный кюветный отсек принимает кюветы размером до Ширина 12,5 ммЭто означает, что стандартная микрокварцевая ячейка - например, Hellma 105-QS с длиной пути 10 мм и рабочим объемом 70 мкл - устанавливается непосредственно в держатель без дополнительного адаптера. Однако для субмикроформатов с меньшей площадью основания требуется специальное устройство Agilent Держатель для микрообъемных кювет (артикул 5190-0920)в котором используется подпружиненная фиксирующая скоба для центрирования меньшей кюветы на высоте луча 8,5 мм. Без этого держателя субмикро-кювета, помещенная в оголенный отсек, будет смещена от оси примерно на 2-3 ммчто делает любое измерение абсорбции ниже 280 нм ненадежным.

Повторяемость размещения кювет более важна для Cary 60, чем для любой другой двухлучевой платформы CaryПоскольку однолучевая конструкция означает, что холостые измерения и измерения образца проводятся последовательно через один и тот же оптический канал, любой позиционный сдвиг между двумя измерениями не отменяется и вместо этого накапливается непосредственно в отчетном значении абсорбции.

Cary 100 и Cary 300 - двухбалочные отсеки и держатели для принадлежностей

Cary 100 и Cary 300 - двухлучевые приборы, разделяющие пучок источника на каналы образца и эталона одновременно, что позволяет компенсировать кратковременные колебания лампы и снизить чувствительность к незначительным несоответствиям в расположении кювет по сравнению с Cary 60.

Обе модели имеют общую высоту балки 8,5 мм и отсек для образцов, рассчитанный на стандартную площадь 12,5 мм × 12,5 мм. Размеры отсека Cary 100 составляют примерно 120 мм в глубинуВ то время как более просторное отделение Cary 300 имеет примерно 170 мм в глубину позволяет использовать более широкий спектр держателей аксессуаров, включая Аксессуар для микрообъемов Agilent (номер детали 8453-68705)который поддерживает микро-кварцевые кюветы с длиной пути от 0,5 мм - 10 мм и рабочие объемы до 15 мкл. Оба прибора принимают этот аксессуар, но более глубокий отсек Cary 300 обеспечивает дополнительный зазор для работы с кюветой без нарушения соседней оптики. Длина пути менее 1 мм требует пристального внимания: при 0,5 мм ширина внутренней полости составляет всего 0,5 мм, и капиллярные силы значительно усложняют процесс заполнения и очистки.

Двухлучевая коррекция Cary 100/300 не компенсирует неполное заполнениеПоэтому минимальный рекомендуемый объем заполнения для микрокварцевой кюветы с дорожкой 0,5 мм в любом приборе составляет 8 мкл над центром луча - порог, который должен соблюдаться независимо от того, насколько точно кювета расположена в других случаях.

Cary 4000 и Cary 5000 - отделения исследовательского класса для субмикрообъемов

Приборы Cary 4000 и Cary 5000 представляют собой платформы Agilent исследовательского класса UV-Vis-NIR, и оба имеют отсек для образцов размером примерно четыре раза по внутреннему объему больше, чем у Cary 60 - разница имеет прямое практическое значение для диапазона форматов микрокварцевых кювет, которые могут быть использованы.

В этот расширенный отсек помещается весь диапазон форматов микро-кварцевых кювет, включая суб-микро кюветы с внешними площадками размером до 3,5 мм × 3,5 ммпри условии использования соответствующего прецизионного адаптера. Cary 5000 поддерживает длины трасс до 0,2 мм - Самый короткий из имеющихся в продаже микрокварцевых каналов - соответствует рабочему объему примерно 3 мкл. Для расширения БИК Cary 5000 до 3300 нмКварц остается подходящим материалом для окон примерно до 3500 нм; за пределами этой длины волны, фторид кальция¹ или фтористо-бариевые окна - ограничение, которое влияет на выбор материала корпуса кюветы, а не на площадь основания или Z-размер.

Cary 4000, не выходящая в ближний инфракрасный диапазон за пределы 900 нм, полностью совместима с той же линейкой микрокварцевых кювет, что и Cary 5000, в области UV-Vis. и поэтому является предпочтительным выбором в тех случаях, когда не требуется расширение БИК, а пространство отсека является главной задачей.

Серия Agilent Cary - совместимость с кварцевыми кюветами Micro

Модель прибора	Высота луча (мм)	Глубина отсека (мм)	Мин. Длина траектории (мм)	Мин. Рабочий объем (мкл)	Адаптер для субмикро
Кэри 60	8.5	~80	1	70	Да - 5190-0920
Кэри 100	8.5	~120	0.5	15	Да - 8453-68705
Кэри 300	8.5	~170	0.5	15	Да - 8453-68705
Кэри 4000	8.5	Расширенный	0.2	3	Да - зависит от конкретной модели
Кэри 5000	8.5	Расширенный	0.2	3	Да - зависит от конкретной модели

---

Технические характеристики приемки ультрафиолетовых кювет Shimadzu серии Micro и кварцевых кювет

Приборы Shimadzu UV-Vis занимают значительную долю мирового академического и промышленного лабораторного рынка, а серии UV-1900, UV-2600 и UV-3600 являются одними из наиболее часто упоминаемых моделей в обсуждениях совместимости микро-кювет на форумах Protocol Online и CHEMnetBASE. Очень важно, что спецификации Shimadzu по высоте пучка отличаются от стандарта 8,5 мм, используемого Agilent и PerkinElmer, по крайней мере, в одном из основных семейств моделей, что делает проверку высоты пучка важным первым шагом перед тем, как предположить, что любая микрокварцевая кювета, приобретенная для одной платформы, легко перейдет на прибор Shimadzu.

UV-1900i - фиксированная высота луча и держатель микроячеек MPC-3100

UV-1900i работает с фиксированной высотой луча 8,0 мм - На 0,5 мм ниже чем стандарт 8,5 мм, используемый большинством конкурирующих платформ, - разница, которая имеет значение для лабораторий, разделяющих запасы микрокварцевых кювет на несколько марок приборов.

Микро-кварцевая кювета, откалиброванная по Z-измерению 8,5 мм, расположит свое прозрачное окно на 0,5 мм выше центра луча UV-1900i, обрезая верхнюю часть луча и внося ошибку поглощения, которая обычно составляет от 3-8% при концентрациях выше 1 AU. Shimadzu решает эту проблему с помощью MPC-3100 Держатель микроячеекОткалиброванный на заводе на высоту луча 8,0 мм, он принимает микро-кварцевые кюветы с внешними размерами 12,5 мм × 12,5 мм, длина пути от 1 мм - 10 мм, и рабочие объемы из От 35 мкл до 3500 мкл. Для длины пути менее 1 мм компания Shimadzu в настоящее время не предлагает держатель для UV-1900i; адаптеры сторонних производителей Hellma Analytics (серия 100) могут быть установлены на 8,0 мм, но это требует явной проверки Z-измерения перед использованием.

Не следует путать модель UV-1900i с моделью UV-1800Он имеет аналогичное шасси, но работает на высоте балки 8,5 мм - Эти два прибора не являются взаимозаменяемыми с точки зрения адаптера для микро-кювет, а неправильно маркированные держатели в многоприборных установках являются документированным источником систематической погрешности измерений.

UV-2600 и UV-2700 - использование микроячеек с переменным лучом и увеличенной длиной волны

В отличие от UV-1900i, UV-2600 и UV-2700 оснащены механизм регулировки высоты балки которые могут быть установлены на 8,0 мм или 8,5 мм, что делает эти платформы Shimadzu наиболее гибкими для размещения микро-кварцевых кювет различных производителей без необходимости специальной подгонки.

UV-2700 расширяет диапазон измерений до 185 нм в глубоком ультрафиолете, что накладывает дополнительные ограничения на чистоту кварца для любой кюветы, используемой в этой области длин волн. Стандартный кварц Spectrosil B надежно пропускает до примерно 170 нмНо низкосортный синтетический кварц с повышенным содержанием металлических примесей будет демонстрировать начало поглощения выше 200 нм, маскируя пики аналитов в диапазоне 185-200 нм. Для работы в глубоком ультрафиолете на приборе UV-2700 следует использовать только Плавленый кварц УФ-класса Следует использовать кюветы с документально подтвержденным пропусканием при 185 нм, отвечающие оптическим требованиям ISO 9001. К UV-2600 и UV-2700 подходят адаптеры для микро-кювет, совместимые с обеими высотами луча; аксессуаром для этих моделей является MPC-3100 в сочетании с регулировочной прокладкой по высоте, входящей в комплект поставки прибора.

Исследователи, переходящие от микро-кварцевых кювет к УФ-1900i и УФ-2600 в одной лаборатории, должны сбрасывать высоту луча на УФ-2600 перед каждым сеансом. - процедурный шаг, который легко упустить из виду, но при его пропуске возникают усугубляющие позиционные ошибки.

UV-3600 Plus - расширенные измерения в БИК и ограничения кварцевого окна

UV-3600 Plus - флагманский трехдетекторный UV-Vis-NIR прибор компании Shimadzu, охватывающий 185 нм - 3300 нм с использованием фотоэлектронного умножителя (UV-Vis), детектора InGaAs (NIR-I) и детектора PbS (NIR-II).

Кюветы из кварца подходят для использования в UV-3600 Plus в ультрафиолетовом и видимом диапазоне без каких-либо оговорок, но собственное поглощение кварца начинает давать заметные помехи выше примерно 2700 нм и становится непомерно высокой после 3500 нм. Для БИК-измерений в диапазоне 2700-3300 нм следует использовать микроячейки с фторидом кальция (CaF₂). Отсек для образцов UV-3600 Plus имеет высоту луча 8,5 мм и непосредственно вмещает стандартную площадь микро-кюветы 12,5 мм × 12,5 мм, при этом Shimadzu MPC-3100 держатель, обеспечивающий микрообъемное сиденье. Внутренний объем отсека - примерно Глубина 240 мм - обеспечивает достаточный зазор для установки даже самых высоких сборок адаптеров микро-кювет без механического вмешательства в работу механизма автоматического переключения детекторов.

Для работы с субмикроформатами на UV-3600 Plus требуется такой же подход к адаптерам сторонних производителей, как и для других моделей Shimadzuс изменением размера по Z до 8,5 мм, проверенным по документированному положению луча прибора перед первым измерением.

Серия ультрафиолетовых кювет Shimadzu - совместимость с микрокварцевыми кюветами

Модель прибора	Высота луча (мм)	Регулируемая высота балки	Нижний предел УФ-излучения (нм)	Держатель Native Micro	Мин. Длина траектории (мм)
UV-1800	8.5	Нет	190	MPC-3100	1
UV-1900i	8.0	Нет	190	MPC-3100	1
UV-2600	8.0 / 8.5	Да	185	MPC-3100 + шим	0.5
UV-2700	8.0 / 8.5	Да	185	MPC-3100 + шим	0.5
UV-3600 Plus	8.5	Нет	185	MPC-3100	0.5

---

Серия PerkinElmer LAMBDA, оснащенная микрокварцевыми кюветами

Серия LAMBDA компании PerkinElmer занимает прочные позиции в фармацевтических лабораториях контроля качества и определения характеристик материалов, постоянно появляясь в результатах поиска Google и обсуждениях нормативных методов разработки наряду с запросами о совместимости с кюветами UV-Vis. LAMBDA 265, 365 и 465 представляют собой три уровня одной и той же архитектуры платформы - каждый из них имеет общую оптическую философию, но существенно отличается объемом отсека для образцов и диапазоном аксессуаров, что напрямую связано с удобством использования микрокварцевых кювет в различных лабораторных рабочих процессах.

LAMBDA 265 - компактные размеры отсека и возможность установки микро-кюветы

LAMBDA 265 - это двухлучевой прибор начального уровня в текущей линейке PerkinElmer, а его отсек для образцов - полностью функциональный для стандартных кювет диаметром 1 см - является наиболее ограниченным по площади из трех моделей LAMBDA, с внутренней глубиной около 100 мм.

Высота балки LAMBDA 265 зафиксирована на отметке 8,5 ммСоответствует Z-размеру стандартных микрокварцевых кювет без необходимости настройки. PerkinElmer предлагает Держатель для микрообъемных ячеек (B0505580) для этого прибора, вмещающего микро-кварцевые кюветы с площадью основания 12,5 мм × 12,5 мм и длиной пути от 1 мм - 10 ммс минимальным рабочим объемом 35 мкл при длине пути 10 мм. При установленном держателе микроячеек не хватает бокового зазора для второго одновременного положения кюветы, поэтому измерения холостого образца и образца должны проводиться последовательно, а не параллельно.

Для высокопроизводительной работы с микрообъемами УФ-излучения, требующей быстрого вычитания пробелов, геометрия отсека LAMBDA 265 делает его менее эффективным в эксплуатации, чем LAMBDA 365 или 465. - даже несмотря на эквивалентные базовые оптические характеристики в том же диапазоне длин волн и при той же высоте луча.

LAMBDA 365 и LAMBDA 465 - расширенные отсеки и многоячеечные микропринадлежности

LAMBDA 365 и LAMBDA 465 имеют расширенный отсек для образцов - примерно Глубина 160 мм и 210 ммсоответственно, что обеспечивает значительно большую операционную гибкость для рабочих процессов с микрокварцевыми кюветами, чем позволяет LAMBDA 265.

Обе модели поддерживают стандарт Высота луча 8,5 мм и имеют одинаковую внешнюю площадь (12,5 мм × 12,5 мм). Ключевое функциональное различие заключается в том, что в отсеке LAMBDA 465 размещается прибор PerkinElmer Аксессуар для транспортировки нескольких ячеекс возможностью установки до шесть кварцевых кювет одновременно в моторизованной карусели для автоматизированного последовательного измерения без ручной замены кювет - с длиной пути от 0,5 мм - 10 мм во всех шести позициях. LAMBDA 365 поддерживает четырехпозиционную версию той же карусели. Для микрокварцевых кювет с длиной пути 0,2 ммНи для одной из моделей не предусмотрен поддерживаемый заводом держатель; для ячеек с ультракоротким ходом при такой спецификации требуются специальные приспособления для выравнивания от сторонних поставщиков.

Многопозиционная карусель на LAMBDA 465 снижает разброс позиционирования между последовательными измерениями до менее чем 0,1 ммЭто уточнение актуально для высокоточной количественной работы, где согласованность межвыборочных Z-измерений так же важна, как и абсолютное значение Z-измерения.

Серия PerkinElmer LAMBDA - совместимость с микрокварцевыми кюветами

Модель прибора	Высота луча (мм)	Глубина отсека (мм)	Многопозиционный держатель	Мин. Длина траектории (мм)	Мин. Рабочий объем (мкл)
ЛАМБДА 265	8.5	~100	Нет	1	35
LAMBDA 365	8.5	~160	Да - 4-позиционный	0.5	15
LAMBDA 465	8.5	~210	Да - 6-позиционный	0.5	15

---

Приборы Thermo Fisher в паре с микрокварцевыми кюветами

Приборы серии GENESYS и Evolution компании Thermo Fisher являются доминирующими платформами UV-Vis в университетских учебных лабораториях и контрактных исследовательских организациях по всей Северной Америке и Европе, что порождает большое количество вопросов о совместимости кювет на форуме Reddit r/labrats и на форуме научного сообщества Thermo Fisher. Понимание высоты пучка и конфигурации аксессуаров для каждой модели особенно важно, поскольку приборы GENESYS и Evolution часто находятся рядом друг с другом в одном и том же учреждении, а микрокварцевые кюветы регулярно перемещают между приборами, не проверяя, действительно ли параметры высоты пучка идентичны у разных моделей - предположение, которое не всегда справедливо.

GENESYS 150 и GENESYS 180 - согласованность высоты луча и аксессуары для микроячеек

GENESYS 150 и GENESYS 180 имеют идентичную геометрию оптической скамьи, с фиксированной высотой луча 8,5 мм и стандартный кюветный отсек, позволяющий без адаптации использовать внешнюю площадь 12,5 мм × 12,5 мм.

Thermo Fisher поставляет Аксессуар для микрообъема (номер по каталогу 840-208300) для обеих моделей, поддерживающих микро-кварцевые кюветы с длиной пути от 1 мм - 10 мм и минимальный рабочий объем 40 мкл при длине волны 10 мм. GENESYS 180 расширяет диапазон длин волн до 190 нмпо сравнению с нижним пределом GENESYS 150, составляющим 198 нмРасширение на 8 нм в глубокий УФ не меняет спецификацию держателя кюветы, но накладывает то же требование к чистоте кварца УФ-класса, которое описано для Shimadzu UV-2700 - кюветы с нечистым началом поглощения выше 192 нм будут создавать искусственно завышенные базовые линии на GENESYS 180 на самых коротких длинах волн. Оба прибора несовместимы с субмикро-кюветами (площадь менее 12,5 мм × 12,5 мм) без центрирующего адаптера стороннего производителя.

В настоящее время компания Thermo Fisher не предлагает держатели субмикроячеек для линии GENESYS.Это отличает данные приборы от платформ Cary 100/300 и LAMBDA 365/465, для которых субмикроаксессуары доступны напрямую при поддержке производителя.

Evolution 201 и Evolution 220 - характеристики исследовательского отсека для работы с микрообъемами

Evolution 201 и Evolution 220 представляют собой средние двухлучевые UV-Vis платформы Thermo Fisher, и обе они имеют значительно более глубокий отсек для образцов, чем серия GENESYS - отсек Evolution 220 имеет размеры примерно 145 мм в глубинуПо сравнению с GENESYS 150/180's 95 мм.

Эта дополнительная глубина позволяет Evolution 220 вмещать Thermo Fisher Аксессуар для микрообъема Dual Mini, который позиционирует две микрокварцевые кюветы в пучках образца и эталона одновременно, устраняя последовательный шаг вычитания холостых проб, необходимый в однопозиционных держателях, и соответственно сокращая время измерения на образец. Обе модели поддерживают стандарт Высота луча 8,5 мм. При непосредственном использовании в полевых условиях микро-кварцевые кюветы Hellma Analytics - в частности, серия 100-QS с длиной пути 10 мм и объемом 3500 мкл и серия 105-QS с длиной пути 10 мм и микрообъемом 70 мкл - устанавливаются непосредственно в двойной аксессуар Evolution 220 без регулировки. В модели Evolution 201, лишенной возможности использования двойного аксессуара, используется однопозиционный держатель микроячеек с той же геометрией щели и высотой луча.

Высота балки одинаковая для обеих моделей Evolution Это означает, что любая микрокварцевая кювета, проверенная на совместимость по Z-измерению на Evolution 201, может быть перенесена непосредственно на Evolution 220 без повторной проверки, что является практическим преимуществом при работе с несколькими приборами.

Thermo Fisher GENESYS и Evolution Series - совместимость с микрокварцевыми кюветами

Модель прибора	Высота луча (мм)	Глубина отсека (мм)	Двухпозиционный держатель	Нижний предел длины волны (нм)	Мин. Рабочий объем (мкл)
GENESYS 150	8.5	~95	Нет	198	40
GENESYS 180	8.5	~95	Нет	190	40
Эволюция 201	8.5	~120	Нет	190	35
Эволюция 220	8.5	~145	Да	190	35

---

Платформы NanoDrop и причины отказа от использования микрокварцевых кювет

Пожалуй, ни один прибор не вызывает такой путаницы в обсуждении совместимости при измерении ультрафиолетового излучения в микрообъемах, как серия Thermo Fisher NanoDrop, которая неоднократно появляется в панелях People Also Asked для запросов, связанных с работой с микро-кюветами, но при этом представляет собой принципиально иную архитектуру измерения, чем любая платформа на основе кювет.

• Оптический путь на основе пьедестала: Все приборы NanoDrop - это 1000, 2000, 2000c и One - использовать систему измерения на пьедестале, в которой 1-2 мкл Образец пипетируется непосредственно на нижнюю поверхность пьедестала. Поверхностное натяжение удерживает столбик жидкости на месте, в то время как верхний пьедестал опускается для контакта, образуя самокалибрующийся жидкостный мост с длиной пути. Длина пути не фиксирована, а рассчитывается в реальном времени на основе опорной длины волны, динамически изменяясь от От 0,05 мм до 1 мм в зависимости от концентрации образца. Нет ни слота для кюветы, ни держателя кюветы, ни параметра высоты луча, который нужно задавать - ведь в качестве оптического элемента выступает сам образец.

Прибор NanoDrop 2000c включает в себя порт вторичной кюветыИменно эту особенность чаще всего путают с совместимостью с микро-кюветами. Этот порт предназначен исключительно для стандартных Кюветы для флуоресценции с длиной пути 10 мм с использованием светодиодного возбуждения при 470 нм или 530 нм - только для обнаружения флуоресценции, но не УФ-поглощения. Через этот кюветный порт не пропускается ультрафиолетовая дейтериевая лампа ни в одном из режимов работы. Порт принимает кюветы размером 10 мм × 10 мм; он не принимает кюветы формата микро-кварц в любой конфигурации, и его модификация для этого не поддерживается оптической конструкцией прибора.

Функциональным эквивалентом ультрафиолетовой микро-кварцевой кюветы на любой платформе NanoDrop является само измерение на пьедестале. В тех случаях, когда существует опасение загрязнения пьедестала или переноса между образцами - например, при работе с вязкими растворами полимеров или высококонцентрированными реактивами нуклеиновых кислот с липкими буферами, - правильным решением будет не устанавливать кювету в NanoDrop, а перенести измерения на специальный UV-Vis спектрофотометр с проверенным держателем микро-кювет, как описано в предыдущих разделах.

---

Оптические требования к флуорометрам и микрокварцевым кюветам Horiba

При переходе от измерения поглощения в УФ-Виде к измерению флуоресценции возникает принципиально иная оптическая геометрия, которая меняет все аспекты требований, предъявляемых к кювете. При флуорометрии возбуждающий луч проходит через одну грань кюветы, а эмиссия собирается на 90° через перпендикулярную поверхность - это означает, что все четыре вертикальные поверхности должны быть отполированы до уровня флуоресценции, что исключает использование стандартных ячеек UV-Vis-класса только с двумя отполированными поверхностями. Серии FluoroMax и Aqualog компании Horiba являются наиболее цитируемыми платформами флуорометров в этом контексте, постоянно появляясь в первых результатах цитирования приборов в Google Scholar и в специальных темах по технике флуоресценции на ResearchGate.

FluoroMax-4 и FluoroMax Plus - четырехсторонняя трансмиссия и выравнивание окон микро-кювет

FluoroMax-4 и его преемник FluoroMax Plus используют монохроматор Черни-Тернера в обоих каналах возбуждения и эмиссии, создавая сфокусированный пучок возбуждения приблизительно 3 мм в диаметре в положении образца - достаточно узкий, чтобы очистить внутренние стенки стандартной кюветы с внутренней полостью 10 мм × 10 мм, но достаточно жесткий, чтобы вызвать частичное смыкание стенок в микрокварцевых кюветах с внутренней шириной менее 3 мм.

Серия FluoroMax принимает стандартные кюветы 12,5 мм × 12,5 мм с высотой луча 8,5 мм. Компания Horiba поставляет Держатель микрообъемных флуоресцентных ячеек (артикул F-3004)центрирование микрокварцевой кюветы с длиной пути 10 мм на правильной высоте и угле поворота луча для сбора излучения под углом 90°, с минимальным рабочим объемом 70 мкл. Для кювет с внутренней полостью 3 мм × 3 мм или меньше держатель оснащен перегородчатой маской, которая блокирует рассеянный стенками возбуждающий свет от попадания в оптику для сбора эмиссии. Микро-кварцевые кюветы для флуоресценции Hellma (тип 105.250-QS) с четыре полированные грани и сертифицированный уровень автофлуоресценции ниже 5 отсчетов/с при эмиссии 450 нм являются стандартным эталонным форматом для процедур валидации FluoroMax.

FluoroMax Plus добавляет опцию отсекающего фильтра на 350 нм в канале эмиссии. - Эта особенность особенно полезна при работе с микрокварцевыми кюветами в ближнем УФ-диапазоне возбуждения (300-350 нм), где даже кварц УФ-класса демонстрирует слабый пик комбинационного рассеяния вблизи 30 нм выше длины волны возбуждения, который может перекрываться со слабыми эмиссионными полосами от низкоконцентрированных аналитов.

Horiba Aqualog - 2D картирование эмиссии и ограничение объема для микрокварцевых ячеек

Aqualog - это одновременный матрица возбуждения-излучения (EEM)² прибор с помощью ПЗС-детектор вместо сканирующего эмиссионного монохроматора, что позволяет получать полный двумерный ландшафт флуоресценции - с длиной волны возбуждения от 240 нм - 600 нм и выброс из 212 нм - 620 нм - в одном приобретении, которое длится всего 0,1 секунды.

Такая архитектура одновременного детектирования делает Aqualog уникально чувствительным к артефактам рассеяния от стенок кюветы. ПЗС-матрица захватывает весь спектр излучения сразу на всех длинах волн возбуждения, что означает, что любое рассеяние Рэлея или Ми от неидеально отполированной поверхности проявляется в виде полос на всей матрице ЭЭМ, а не в виде локализованного артефакта на одной длине волны излучения. Поэтому микрокварцевые кюветы, используемые в Aqualog, должны соответствовать спецификации шероховатости поверхности (Ra) менее 0,5 нм на всех четырех гранях - строже, чем Ra ≤ 2 нм, допустимое для работы с FluoroMax-4. Стандартный кюветный отсек Aqualog занимает ту же площадь 12,5 мм × 12,5 мм, а высота луча составляет 8,5 мм.

Минимальный рекомендуемый рабочий объем для микрокварцевых кювет Aqualog составляет 150 мкл при длине пути 10 мм. - выше, чем для FluoroMax, поскольку одновременное получение ЭЭМ требует, чтобы столб жидкости оставался невозмущенным в течение всего сканирования возбуждения, что исключает очень малые объемы заполнения, допустимые для одноволновых измерений FluoroMax.

Серия флуорометров Horiba - совместимость с микрокварцевыми кюветами

Модель прибора	Высота луча (мм)	Диапазон возбуждения (нм)	Мин. Рабочий объем (мкл)	Требуется 4-сторонняя полировка	Держатель Native Micro
ФторМакс-4	8.5	200-900	70	Да	F-3004
FluoroMax Plus	8.5	200-900	70	Да	F-3004
Aqualog	8.5	240-600	150	Да (Ra < 0,5 нм)	Стандартный отсек + адаптер

---

Модели приборов Edinburgh Instruments, принимающие микрокварцевые кюветы

Компания Edinburgh Instruments занимает специализированное место на рынке флуоресцентных приборов: ее платформы FS5 и FLS1000 являются выбором для измерений флуоресценции и фосфоресценции во временном разрешении в исследовательских группах по физической химии и материаловедению во всем мире. Оба прибора регулярно появляются в обсуждениях микрокювет на ResearchGate - особенно в темах, связанных с измерением квантового выхода коллоидных наночастиц и растворов органических красителей - там, где нехватка образцов делает микрообъемные кюветы не предпочтением, а практической необходимостью, которую невозможно заменить более объемным форматом.

Спектрофлуорометр FS5 - варианты геометрии камеры для образцов и держателей микроячеек

FS5 - это компактный спектрофлуорометр с постоянным и временным разрешением, охватывающий диапазон возбуждения от 200-1000 нм и диапазон выбросов 200-1650 нмс камерой для образцов, построенной на стандартной площади 12,5 мм × 12,5 мм, и фиксированной высотой луча 8,5 мм.

Edinburgh Instruments предлагает SC-05 Держатель для микро-кюветы специально для FS5, принимая микро-кварцевые кюветы с длиной пути 10 мм и минимальным рабочим объемом 45 мкл. Держатель SC-05 позиционирует прозрачное окно кюветы точно на расстоянии 8,5 мм от основания с допуском ±0,1 мм - Значительно точнее, чем ±0,3 мм, характерные для универсальных адаптеров сторонних производителей - точность, которая имеет большое значение, поскольку возбуждающий луч FS5 в позиции образца фокусируется до диаметра приблизительно 2 мм. Даже ошибка в 0,2 мм в Z-измерении при таком диаметре пучка смещает центр пучка из столба жидкости в стенку кюветы в микроячейке с высотой внутренней полости 5 мм.

Для субмикро-кювет с площадью основания менее 12,5 мм × 12,5 мм компания Edinburgh Instruments не предлагает держатель FS5 собственного производства. - Адаптер Hellma Type 105, с зазором 8,5 мм, является единственным проверенным решением сторонних производителей с документально подтвержденной совместимостью с FS5 во всем диапазоне излучения прибора.

FLS1000 - модульная конфигурация отсеков для кварцевых ячеек суб-микро объема

FLS1000 - это исследовательская платформа премиум-класса от Edinburgh Instruments, и ее определяющей особенностью для работы с микро-кюветами является полностью модульная камера для образцов - Отсек может быть изменен с помощью сменных креплений для размещения стандартных кювет, микрокварцевых ячеек, интегрирующих сфер, криостатов и проточных кювет без перемещения или перестановки прибора между конфигурациями.

Модульная архитектура FLS1000 позволяет использовать микро-кварцевые кюветы с рабочим объемом до 20 мкл при длине пути 10 мм при использовании Edinburgh Instruments MH-10 Держатель для микрообъемовкоторый крепится непосредственно к направляющей оптического стола FLS1000. В режиме TCSPC (коррелированный по времени подсчет одиночных фотонов) чувствительность прибора по подсчету фотонов достаточно высока, чтобы обнаружить флуоресценцию образцов с концентрацией ниже 1 нМ в кварцевой кювете объемом 20 мкл - при условии, что собственная автофлуоресценция кюветы ниже 50 фотонов/с при длине волны измерения - порог, который исключает использование стандартных кювет из боросиликатного стекла и требует использования синтетического кварца УФ-класса (тип Spectrosil 2000 или эквивалент) для всех работ с TCSPC при излучениях ниже 400 нм. Модульный отсек также вмещает субмикро-кварцевые кюветы с Площадь основания 3,5 мм × 3,5 мм с помощью центрирующего блока, поставляемого с держателем MH-10.

FLS1000 - один из немногих коммерческих флуорометров с документированной поддержкой субмикро форматов кварцевых кювет.что делает его рекомендованной платформой для приложений флуоресценции с временным разрешением, где дефицит образцов и высокое временное разрешение являются одновременными ограничениями.

Edinburgh Instruments - Совместимость с кварцевыми кюветами Micro

Модель прибора	Высота луча (мм)	Диапазон излучения (нм)	Мин. Рабочий объем (мкл)	Держатель Native Micro	Поддержка субмикроформатов
FS5	8.5	200-1650	45	SC-05	Только для третьих лиц
FLS1000	8.5	200-1650	20	MH-10	Да - от первого лица

---

Varian Cary Eclipse Micro Quartz Cuvette Fitment and Performance

Первоначально производимый компанией Varian, а теперь продаваемый под брендом Agilent, Cary Eclipse остается одним из наиболее широко цитируемых флуорометров в опубликованных спектроскопических методах - и его по-прежнему ищут преимущественно под обозначением "Varian Cary Eclipse" в Google, что отражает глубину наследия его установленной базы. Архитектура импульсной ксеноновой лампы выгодно отличает его от флуорометров с непрерывным источником, таких как FluoroMax, что напрямую влияет на взаимодействие микрокварцевых кювет с его оптической системой в режимах флуоресценции, фосфоресценции и хемилюминесценции.

Технические характеристики Cary Eclipse Standard Compartment - Micro Cuvette Holder

В отсек для образцов Cary Eclipse помещаются стандартные кюветы размером 12,5 мм × 12,5 мм с фиксированной высотой луча 8,5 ммчто соответствует платформам FluoroMax-4 и FS5.

Компания Agilent (Varian) поставляет Держатель ячеек для микрообъемов (номер детали 040-503900-91) для Cary Eclipse, поддерживающий микро-кварцевые кюветы с длиной пути от 1 мм - 10 мм и минимальный рабочий объем 50 мкл при длине пути 10 мм. Держатель оснащен механизмом регулировки по двум осям - горизонтальному центрированию и вертикальной высоте - что позволяет использовать микрокварцевые кюветы с размерами Z между 8,0 мм и 9,0 мм без регулировки - диапазон регулировки ±0,5 мм, что значительно шире, чем у держателей с фиксированным положением, поставляемых с FluoroMax-4 и FS5. Такой допуск делает систему держателей микрокювет Cary Eclipse наиболее щадящей к производственным различиям между марками кювет среди флуорометров, рассмотренных в этой статье.

Импульсная ксеноновая лампа Cary Eclipse обеспечивает пиковое излучение, примерно в 75 000 раз превышающее излучение ксеноновой лампы с непрерывным источником. - цифра, означающая, что даже незначительный срыв пучка, вызванный смещением по Z-измерению, может привести к артефактам фотодеградации в светочувствительных образцах при микроконцентрациях, когда соотношение объема пучка к объему образца уже неблагоприятно.

Режимы фосфоресценции и хемилюминесценции - порог автофлуоресценции кварцевой кюветы

Измерения фосфоресценции и хемилюминесценции на Cary Eclipse предъявляют самые строгие требования к материалу кюветы из всех распространенных спектроскопических методов, поскольку оба режима основаны на обнаружении очень слабых сигналов - часто в диапазоне 1-100 фотонов/с - на фоне, включающем собственное фотолюминесцентное излучение материала кюветы.

Микро-кюветы из боросиликатного стекла категорически не подходят для работы с фосфоресценцией на Cary Eclipse, поскольку боросиликатное стекло демонстрирует широкую полосу фотолюминесценции с центром вблизи 520 нм с интенсивностью примерно 500-2000 фотонов/с при УФ-возбуждении, полностью перекрывая сигналы фосфоресценции большинства органических соединений. Микрокварцевые кюветы, изготовленные из синтетического плавленого кварца УФ-класса (Spectrosil B или эквивалент типа 214), демонстрируют уровни автофлуоресценции менее 10 фотонов/с при эмиссии 400 нм при возбуждении 300 нм, что делает их единственным подходящим материалом для кювет в режиме фосфоресценции Cary Eclipse. Для измерений хемилюминесценции, которые не требуют источника возбуждения и полностью зависят от самоэмиссии образца, затвор возбуждения закрыт, что устраняет проблему автофлуоресценции кюветы; в этом режиме можно использовать любую оптически прозрачную микро-кювету с правильным Z-размером и площадью основания.

Практическим следствием этих ограничений для каждого режима является то, что для всех трех режимов измерений на Cary Eclipse достаточно одной микро-кварцевой кюветы флуоресцентного класса.В то время как стандартная ячейка UV-Vis-класса ограничена только режимом флуоресценции и совершенно не подходит для работы с фосфоресценцией, независимо от ее размерной совместимости.

Совместимость кювет Varian Cary Eclipse - Micro Quartz

Режим измерения	Мин. Рабочий объем (мкл)	Требуемая степень кварца	Предел автофлуоресценции (фотоны/с)	Диапазон размеров по Z (мм)
Флуоресценция	50	Предпочтение отдается ультрафиолетовому излучению	< 50	8.0-9.0
Фосфоресценция	50	УФ-излучение плавленого кварца обязательно	< 10	8.0-9.0
Хемилюминесценция	50	Стандартный сорт допустим	Без ограничений	8.0-9.0

---

Размерные характеристики микрокварцевых кювет, определяющие возможность их использования в разных марках

После установления совместимости приборов на семи основных платформах необходим столь же строгий подход со стороны кювет - в частности, понимание того, как размерные характеристики, указанные в техническом паспорте микрокварцевой кюветы, напрямую влияют на совместимость приборов. Такой подход к реинжинирингу особенно актуален, когда лаборатория получает в наследство коллекцию немаркированных кювет, получает клетки от сотрудничающего учреждения или должна выбрать один формат микрокварцевых кювет, который будет работать на нескольких платформах приборов одновременно, не требуя отдельных конфигураций адаптеров для каждой из них.

Z-измерение как наиболее важный параметр для подбора инструмента

Z-измерение - перпендикулярное расстояние от основания кюветы до центра ее прозрачного измерительного окна - является параметром, наиболее часто вызывающим сбои в совместимости, но в то же время наиболее часто опускаемым в сокращенных технических описаниях кювет и каталогах покупок.

Среди наиболее распространенных моделей микрокварцевых кювет, используемых в европейских и североамериканских исследовательских лабораториях, значения Z-размеров распределяются следующим образом:. Hellma 105-QS (путь 10 мм, 70 мкл) имеет Z-размер 8,5 мм; the Hellma 110-QS (путь 10 мм, 1400 мкл) также указывает 8,5 мм; the Старна 29/Q/10 (путь 10 мм, стандарт 3000 мкл, включен сюда для перекрестной ссылки) указывает 8,5 мм; и Старна 9/Q/0.5 (микроячейка с дорожкой 0,5 мм) указывает 8,5 мм. Эта согласованность отражает неофициальное сближение промышленности в отношении высоты луча УФ-Vis большинства. Однако Hellma 105.853-QS (траектория 3 мм, ультрамикроячейка 8 мкл) имеет размер Z 8,0 ммвыровненной по высоте луча Shimadzu UV-1900i. Помещение этой конкретной ячейки в Agilent Cary 60, Thermo Fisher GENESYS 150 или PerkinElmer LAMBDA 265 без 0,5-миллиметровой регулировки приводит к ошибкам поглощения, составляющим 5-12% при концентрациях выше 0,5 AU.

Единственное наиболее защитное действие, которое может предпринять лаборатория при получении новых микрокварцевых кювет, - это непосредственное измерение Z-измерения. с помощью калиброванного глубиномера и записать его на этикетке кюветы для хранения вместе с длиной пути - это избавляет от необходимости повторно проверять соответствие высоты луча при каждом сеансе работы прибора.

Комбинации длины траектории и внешнего отпечатка в стандартных микроформатах

Выбор длины пути в микрокварцевых кюветах предполагает прямой компромисс между чувствительностью измерений, минимальным объемом образца и практичностью обращения с кюветой - компромисс, имеющий ощутимые последствия для межприборной совместимости, помимо вопроса о Z-измерении.

При длине пути 0,2 мм и 0,5 ммширина внутренней полости равна длине пути, а капиллярные силы доминируют при заполнении: время заполнения полости 0,5 мм при рабочем объеме 7 мкл обычно превышает 45 секунд только под действием силы тяжести, а скорость захвата пузырьков воздуха значительно выше, чем в более широких полостях. Для приборов с длительностью сканирования более 60 секунд - например, Agilent Cary 5000 в режиме полного УФ-Vis-NIR - микрокварцевая кювета с дорожкой 0,5 мм, заполненная до минимального объема, может потерять 0,5-1,5% от его объема испаряется во время одного сканирования при температуре окружающей среды в лаборатории (20-22°C), что приводит к измеримому дрейфу в сторону увеличения кажущейся абсорбции выше 300 нм.

Для измерений, требующих длительности сканирования более 60 секунд, предпочтительнее использовать длину траектории 1 мм и более. независимо от того, позволяет ли концентрация аналита использовать более короткий путь, поскольку изменение концентрации под действием испарения за время сканирования вносит систематическую ошибку, которая не может быть исправлена вычитанием холостого хода.

Технические характеристики длины пути и объема микрокварцевой кюветы

Длина траектории (мм)	Ширина внутренней полости (мм)	Мин. Рабочий объем (мкл)	Внешняя площадь (мм)	Риск капиллярного эффекта
0.2	0.2	3	12.5 × 12.5	Очень высокий
0.5	0.5	7	12.5 × 12.5	Высокий
1	1.0	15	12.5 × 12.5	Умеренный
2	2.0	30	12.5 × 12.5	Низкий
10 (стандартный микро)	10.0	70	12.5 × 12.5	Незначительный
10 (субмикро)	10.0	20-45	8.5 × 8.5	Незначительный

---

Требования к оптическому качеству микрокварцевых кювет, предъявляемые флуорометром по сравнению с УФ-визиром

На лабораторных форумах, в частности на ResearchGate и в техническом сообществе Spectroscopy Online, постоянно возникает вопрос: можно ли перенести микрокварцевую кювету, выбранную для работы в УФ-Виде, непосредственно на флуоресцентные измерения без повторной оценки. Ответ не является категорическим "да" или "нет"; он полностью зависит от количества лицевого лака и характеристик автофлуоресценции конкретной кюветы.

• Количество лака на лице и его оптические последствия: В спектрофотометрах UV-Vis используется линейная геометрия пропускания, при которой луч входит через одну грань и выходит через противоположную грань. Только два лица необходимо полировать; остальные боковые стенки можно шлифовать (матировать) без ущерба для измерений. Флуорометры используют геометрию сбора под углом 90°, при которой излучение выходит через грань, перпендикулярную возбуждающему лучу. Микрокварцевая кювета, имеющая только две полированные грани, будет давать 10-50× более высокий фон рассеивания во флуорометре по сравнению с четырехгранной полированной ячейкой с идентичной длиной пути, эффективно погребая слабые сигналы флуоресценции от низкоконцентрированных аналитов под пьедесталом рассеяния. Этот избыток рассеяния не устраняется вычитанием из пустого пространства, поскольку он нелинейно изменяется в зависимости от интенсивности возбуждения.

• Спецификация автофлуоресценции: Стандартный синтетический кварц класса UV-Vis не содержит спецификации автофлуоресценции в своем техническом описании, поскольку измерения UV-Vis по своей сути являются ратиометрическими - флуктуации источника и рассеяние в пустой кювете вычитаются при каждом получении. Измерения флуоресценции - это абсолютные измерения интенсивности при низких уровнях сигнала, и даже слабая фотолюминесценция материала кюветы вносит постоянный аддитивный фон, который невозможно вычесть без независимой пустой кюветы идентичного оптического качества. Ячейки из плавленого кварца УФ-класса с сертифицированной автофлуоресценцией менее 5-10 отсчетов/с при длине волны измерения - в каталогах продукции они обозначаются как "Fluorescence grade" или "FL grade" - необходимы для всех работ по количественной флуоресценции, включая все форматы микрообъемов, обсуждаемые в этой статье.

• Правило кросс-платформенного переноса: Четырехгранная полированная микрокварцевая кювета флуоресцентного класса совместима с измерениями в режиме УФ-Вид и флуоресценции на всех платформах приборов, описанных выше, при условии проверки Z-размера и внешнего следа. Кюветы с двумя лицевыми сторонами из полированного UV-Vis микрокварца ни при каких обстоятельствах не могут быть введены в отсек флуорометра для количественных измерений. Маркировка каждой кюветы при получении с указанием степени полировки - в дополнение к длине пути и Z-размеру - устраняет наиболее распространенный источник необъяснимых аномалий фона флуоресценции в многоинструментальных лабораториях, где запасы кювет делятся между платформами.

---

Проверка выравнивания микрокварцевой кюветы перед получением спектра

После подтверждения соответствия размеров и параметров оптического класса техническим характеристикам прибора, необходимо выполнить один шаг экспериментальной проверки, требующий не более две минуты - Перед измерением образца убедитесь, что микрокварцевая кювета правильно выровнена в приборе.

Заполните кювету пустым растворителем до предполагаемого рабочего объема и проведите сканирование базовой линии во всем диапазоне длин волн измерения. На правильно выровненной микрокварцевой кювете в приборе UV-Vis базовая линия поглощения должна быть ровной в пределах ±0,002 AU между 250 нм и 700 нм, без восходящего наклона ниже 230 нм за пределами известного профиля поглощения растворителя. На флуорометре проведите сканирование возбуждения с эмиссионным монохроматором, установленным на длину волны 30 нм выше ожидаемый пик комбинационного рассеяния; пустой сигнал должен регистрироваться ниже 5 отсчетов/с в эмиссионном канале.

Любое систематическое смещение вверх базовой линии UV-Vis ниже 230 нм или асимметричный пик рассеяния на длине волны, не соответствующей положению Рамана, указывает на несоответствие Z-измерений или ошибку выравнивания торца кюветы. Для устранения проблем с Z-измерением необходимо отрегулировать высоту адаптера в Шаги по 0,1 мм и повторного запуска заготовки после каждой корректировки - процедура, которая обычно сходится в течение трех итераций. Микрокварцевая кювета, проверенная на чистоту, выравнивается с точностью до ±0,1 мм высоты луча прибора обеспечит воспроизводимость абсорбции лучше, чем 0,3% RSD в десяти последовательных измерениях одного и того же образца, что соответствует критерию приемлемости, приведенному в большинстве фармакопейный УФ-метод³ проверки, включая USP <857> и EP 2.2.25.

---

Заключение

Совместимость с микрокварцевыми кюветами определяется пересечением трех параметров прибора - высоты луча, геометрии щели и минимального объема образца - и двух параметров кюветы - Z-размера и количества полировок поверхности. Из семи рассмотренных здесь платформ высота луча 8,5 мм охватывает большинство спектрофотометров UV-Vis и все рассмотренные флуорометры, а наиболее значительное исключение составляет UV-1900i компании Shimadzu - 8,0 мм. Приборы NanoDrop работают полностью без кювет. Для флуорометров безоговорочно требуются четырехгранные полированные кварцевые кюветы флуоресцентного класса. Двухминутное проверочное сканирование вхолостую является окончательным подтверждением того, что все параметры размеров и материала были правильно подобраны до начала отбора проб.

---

ЧАСТО ЗАДАВАЕМЫЕ ВОПРОСЫ

Можно ли использовать микро-кварцевую кювету, откалиброванную для Agilent Cary, в приборе Shimadzu UV-1900i без модификации?

Не без коррекции с помощью шима. Серия Cary работает с высотой луча 8,5 мм, в то время как UV-1900i использует 8,0 мм. Микрокварцевая кювета с размером Z 8,5 мм будет располагаться на 0,5 мм выше в держателе MPC-3100 прибора UV-1900i, создавая ошибки зажима луча, которые повышают показания поглощения на 3-8% при концентрациях выше 1 AU. Проверенная прокладка 0,5 мм, помещенная под гнездо кюветы, корректирует Z-измерение перед использованием.

Принимает ли кюветный порт NanoDrop 2000c микро-кварцевые кюветы для измерения УФ-абсорбции?

Нет. Через кюветный порт NanoDrop 2000c подается только видимый возбуждающий свет на основе светодиодов (470 нм или 530 нм) для обнаружения флуоресценции; ультрафиолетовая дейтериевая лампа не подается через этот порт ни в одном режиме работы. Все измерения УФ-поглощения на любой модели NanoDrop основаны на пьедестале и требуют 1-2 мкл образца, нанесенного пипеткой непосредственно на измерительную поверхность без кюветы.

Каков минимальный рабочий объем для микро-кварцевой кюветы на Horiba FluoroMax-4?

С держателем микрообъемов Horiba F-3004 FluoroMax-4 поддерживает минимальный рабочий объем 70 мкл в микрокварцевой кювете с длиной пути 10 мм и внешним размером 12,5 мм × 12,5 мм. Такой уровень заполнения обеспечивает полное прохождение 3 мм пучка возбуждения через столб жидкости при высоте пучка 8,5 мм, предотвращая артефакты рассеяния в спектре излучения.

Является ли микрокварцевая кювета класса UV-Vis взаимозаменяемой с микрокварцевой кюветой класса флуоресценции?

Только в одном направлении. Микрокварцевая кювета флуоресцентного класса - четыре полированные грани, автофлуоресценция ниже 5-10 отсчетов/с - совместима как со спектрофотометрами UV-Vis, так и с флуорометрами на всех платформах, описанных в этой статье. Кювета UV-Vis-класса с двумя полированными гранями не может быть использована для количественных измерений флуоресценции; ее неполированные боковые стенки создают фон рассеяния на 10-50× выше, чем у кюветы класса флуоресценции, и не могут быть скорректированы стандартными процедурами вычитания пробелов.

---

Ссылки: